علوم آزمایشگاهی دامپزشکی

محاسبه بار میکروبی شیر ((Total Count

مواد و وسایل مورد نیاز: 1)سرم فیزیولوزی 8.5 کرم نمک در یک لیتر آب مقطر 2)نمونه شیر  3) پیپت استریل  4) لوله آزمایش  5) پلیت استریل 6)محیط کشت پلیت کانت آگار 7) اتو کلاو  8)فور

  روش آزمایش

 در 7 لوله ازمایش مقدار 9 میلی لیتر سرم فیزیولوزی ریخته و اتو کلاو می نماییم.پس از سرد شدن 1 میلی لیتر از نمونه شیر را در لوله اول می ریزیم.سپس به میزان 1 میلی لیتر از لوله اول برداشته در لوله دوم ریخته و به همین ترتیب تا لوله آخر ادامه داده تا رقتهای مورد نظر ایجاد شود. جهت  شمارش بار میکروبی شیر یاTotal Count   از هر کدام از رقتها یک میلی لیتربه طور جداگانه برداشته و  بصورت Pure Plate کشت می دهیم ( با پیپت استریل یک میلی لیتر برداشت نموده ودر پلیت استریل ریخته و  داخل هر پلیت از محیط کشت استریل شده پلیت کانت آگار که نزدیک به انعقاد می باشد با دمای حدود50-40 درجه سانتی گراد می ریزیم.) و در دمای 31 درجه سانتیگراد به مدت 3 روز انکوبه می نماییم.تعداد کلنی هارا شمرده و میانگین شمارش شده رادر رقتهای مختلف محاسبه و بعنوان بار میکروبی شیر Total Count منظور می نماییم.

عکس رقت × عکس میزان تلقیح × تعداد کلنی X=

  نکات مهم :

       باید در هر مرحله از پیپت استریل جدا استفاده نماییم.

      بهتر است جهت شمارش دقیقتر از هر رقت از دو پلیت جهت کشت  Pure Plate استفاده نماییم.